ABSTRACT Velloziaceae is one of the main families in the floristic composition of the Campos Rupestres Montane Savanna ecoregion of the Chapada Diamantina Highland, Bahia, Brazil, and has species with significant ornamental potential and resistance to climate changes. The species Vellozia seubertiana stands out for its beautiful flowers and stems covered by leaf sheaths that ensure protection when in contact with fire. However, there is no information on its propagation, conservation, and physiology, which justifies this study. The objective of this work was to establish a micropropagation protocol for V. seubertiana. Seeds were disinfected and inoculated in Murashige and Skoog culture medium (MS) with half salt concentration (MS½) for in vitro establishment. Plantlets established in vitro were used to induce sprouting in MS½ supplemented with 6-benzylaminopurine (BAP; 0.00, 4.44, 8.88, and 17.76 µM) and 1-naphthaleneacetic acid (NAA; 0.00 and 2.22 µM). The shoots obtained were inoculated in MS½ containing activated charcoal (0.0 and 1.0 g L−¹) and indole-3-butyric acid (IBA; 0.00 and 2.22 µM) for rooting. The rooted plantlets were acclimated under greenhouse conditions. A mean of 5.7 shoots were generated through organogenesis in medium containing 8.75 µM of BAP and 2.22 µM of NAA. The use of activated charcoal resulted in the highest means for aerial part and root lengths in the in vivo rooting phase. Acclimated plants reached 75% survival at 60 days after transplanting to ex vitro conditions. The results indicate that micropropagation is a promising technique for the production of V. seubertiana seedlings.

RESUMO Velloziaceae é uma das principais famílias da composição florística dos campos rupestres da Chapada Diamantina e possui espécies com significativo potencial ornamental e resistência a mudanças climáticas. A espécie Vellozia seubertiana se destaca pela beleza das flores e por possuir caules cobertos por bainhas foliares que asseguram proteção quando em contato com o fogo. Não há relatos sobre a sua propagação, conservação e entendimento da sua fisiologia, o que justifica a realização deste estudo. Este trabalho teve como objetivo estabelecer um protocolo de micropropagação da espécie V. seubertiana. Para o estabelecimento in vitro, as sementes foram desinfestadas e inoculadas em meio MS com metade das concentrações salinas (MS ½). Microplantas estabelecidas in vitro foram utilizadas para a indução de brotos em meio MS ½ suplementado com BAP (0,00; 4,44; 8,88 e 17,76 µM) e ANA (0,00 e 2,22 µM). Os brotos obtidos foram inoculados em meio MS ½ contendo carvão ativado (0,0 e 1,0 g L-¹) e AIB (0,00 e 2,22 µM) para enraizamento. Microplantas enraizadas foram aclimatizadas em casa de vegetação. Obteve-se uma média de 5,7 brotos via organogênese em meio contendo 8,75 µM de BAP e 2,22 µM de ANA. Na fase de enraizamento, a presença do carvão ativado proporcionou as maiores médias para comprimento de parte aérea e comprimento de raiz. As plantas aclimatizadas atingiram 75% de sobrevivência após 60 dias da transferência para a condição ex vitro. Conclui-se que a micropropagação é uma técnica promissora para a produção de mudas de V. seubertiana.

Abstract In vitro multiplication is the main method for seedling production of Comanthera mucugensis, an endangered ornamental plant. The technique consists of cultivating plant tissues under aseptic conditions, controlled environment, and using appropriate culture medium. The physical characteristics of the medium are mainly determined by the presence of a gelling agent. Agar is the most used substance on the in vitro cultivation of C. mucugensis, however, it is one of the most costly components to manufacture the medium. The objective of the present study was to evaluate the effect of κ-carrageenan as an alternative gelling agent in the propagation of C. mucugensis. The seeds and stem explants were cultured on medium gelled with agar or κ-carrageenan, both at 7 g L-1 concentration. The results indicated that the plants established in medium with κ-carrageenan presented an increase in length and induced formation of shoots. Direct organogenesis was also improved with the use of this gelling agent. In comparison, agar culture presented the lowest rate of direct regeneration and the lowest number of shoots. In addition, gelation with κ-carrageenan was efficient in increasing the frequency of callogenesis, as well as, the highest callus regeneration and number of shoots per callus. Rooting was not affected by the type of gelling agent. The substitution of agar for κ-carrageenan can represent a reduction of 23.2% in the cost of manufacturing the culture medium for in vitro propagation of C. mucugensis.

ABSTRACT Water stress impairs plant growth, resulting in the death of the plant in extreme cases. In vitro studies on stress-tolerant species can serve as the basis for improvement through genetic modifications aimed at minimizing damage and providing a controlled environment for performing biochemical and physiological assessments of plants under stress. The Velloziaceae family includes desiccation-tolerant and fire-resistant species; thus, these species can be used for analyzing protective mechanisms and reproductive responses to stress. We hypothesized that species with adaptability to survival under extremely dry conditions would respond to in vitro water stress through resprouting. This study evaluated the extent of water stress induced by the addition of sucrose, mannitol, or polyethylene glycol, the role of water stress as a trigger for in vitro multiplication, and its effect on biochemical responses in Vellozia jolyi, Vellozia punctulata, Vellozia pyrantha, and Vellozia seubertiana. Independent experiments were conducted by supplementing the following concentrations of sucrose, mannitol, and polyethylene glycol to the MS culture medium: sucrose (30 g L−1 [control], 75 g L−1, and 120 g L−1) and mannitol (0.0 g L−1 and 15.96 g L−1) for V. pyrantha; sucrose (15 g L−1 [control], 45 g L−1, and 60 g L−1) and mannitol (0.0 g L−1 and 7.9 g L−1) for the other species; and polyethylene glycol (50 g L−1, 100 g L−1, and 150 g L−1). When sucrose and mannitol were added, shoots had grown in all species, showing significant differences between treatments only for V. pyrantha. Polyethylene glycol did not induce shoot growth but, instead, diminished plant survival. The highest concentration of polyethylene glycol increased proline levels in V. pyrantha. All four species were resistant to water stress, owing to their ability to survive and reproduce under high concentrations of osmoregulators. Our study provides evidence that proline acts as an osmoprotectant of V. pyrantha.

RESUMO O estresse hídrico prejudica o crescimento das plantas, causando a morte em casos extremos. Estudos in vitro com espécies tolerantes ao estresse podem ser a base para o melhoramento genético, visando minimizar esses danos, além de fornecer um ambiente controlado para avaliações bioquímicas e fisiológicas de plantas sob estresse. A família Velloziaceae possui espécies tolerantes à dessecação e resistentes ao fogo, tornando-se um material valioso para a análise de mecanismos de proteção e resposta reprodutiva ao estresse. O objetivo foi avaliar o estresse hídrico com sacarose, manitol e polietilenoglicol como gatilho para multiplicação in vitro e seu efeito na resposta bioquímica de Vellozia jolyi, Vellozia punctulata Vellozia pyrantha e Vellozia seubertiana. Experimentos independentes foram realizados com concentrações de sacarose (30 controle; 75; 120 g L-1) + manitol (0.0; 15.96 g L-1) para V. pyrantha; sacarose (15 controle, 45 e 60 g L-1) + manitol (0.0; 7.9 g L-1) nas demais espécies e polietilenoglicol (0,0, 50, 100 e 150 g L-1) ambos em meio de cultura MS. No teste com sacarose + manitol, foram observadas brotações em todas as espécies com diferença estatística entre os tratamentos apenas para V. pyrantha. O polietilenoglicol não influenciou a indução de brotações e interferiu na porcentagem de sobrevivência de todas as espécies. A maior concentração de polietilenoglicol aumentou o teor de prolina de V. pyrantha. As quatro espécies são resistentes ao estresse hídrico, devido à sua capacidade de sobreviver e se reproduzir em altas concentrações de osmorreguladores. Há evidências que a prolina é um dos osmoprotetores de V. pyrantha.

RESUMO O gênero Melocactus (cabeça-de-frade) possui 32 espécies no Brasil, das quais M. glaucescens e M. paucispinus estão ameaçadas de extinção. O objetivo deste trabalho foi analisar o efeito de diferentes concentrações de sais do meio Murashige e Skoog (MS, MS/2 e MS/4) e sacarose (15 g L-1 e 30 g L-1) na germinação de sementes e crescimento de plantas in vitro de M. glaucescens e a eficiência da esterilização do meio de cultura com hipoclorito de sódio (NaOCl) na germinação de sementes e crescimento de plantas in vitro de M. glaucescens ao utilizar sementes, M. glaucescens e M. paucispinus ao utilizar o segmento apical do cladódio. Para M. glaucescens a germinação final nas diferentes concentrações de MS e sacarose, variou de 53,5 a 68.1% e os melhores resultados para o crescimento in vitro foram observados nas menores concentrações de sais (MS/2 e MS/4) e de sacarose (15 g L-1) com valores de comprimento da parte aérea de 9,70 e 10,76 mm, respectivamente. Não houve diferença na germinação das sementes e crescimento das plantas em meio químico e autoclavado. Conclui-se que, o uso da esterilização química com NaOCl em baixas concentrações de sais (MS/2 e MS/4) e sacarose (15 g L-1) são as mais indicadas para produção de plantas ornamentais germinadas in vitro e /ou segmento apical do cladódio de M. glaucescens e M. paucispinus, o que representa uma redução de custo no cultivo in vitro dessas espécies.

ABSTRACT The genus Melocactus (“cabeça-de-frade”) comprises 32 species in Brazil, of which M. glaucescens and M. paucispinus are threatened with extinction. The present work evaluated the effects of different concentrations of Murashige & Skoog (MS, MS/2 and MS/4) culture medium and sucrose (15 g L-1 and 30 g L-1) on in vitro seed germination and plant growth of M. glaucescens and the efficiency of sterilization with sodium hypochlorite (NaOCl) on in vitro seed germination and plant growth of M. glaucescens when using seeds and M. glaucescens and M. paucispinus when using apical segment of cladode. In M. glaucescens, the final germination at the different MS and sucrose concentrations varied between 53.5 and 68.1% and the best results for in vitro growth were observed with the lowest mineral salt (MS/2 and MS/4) and sucrose (15 g L-1) concentrations, with lengths of the aerial portion of 9.70 and 10.76 mm, respectively. There was no difference in seed germination and plant growth in chemical and autoclave medium. It is concluded that the use of chemical sterilization with NaOCl at low concentrations of salts (MS/2 and MS/4) and sucrose (15 g L-1) are quite advantageous for producing ornamental plants germinated in vitro and/or apical segment of cladode of M. glaucescens andM. paucispinus, representing a reduction of costs for in vitro cultivation of this species.

RESUMO Physalis ixocarpa Brot. ex Horm. é considerada a espécie economicamente mais importante do gênero. A cultura de tecidos é apontada como uma estratégia para a sua propagação; no entanto, pesquisas indicam que as respostas in vitro são genótipo-dependentes. Objetivou-se avaliar a morfogênese in vitro das variedades verde e roxa de P. ixocarpa, tendo-se em vista a propagação massiva da espécie. A capacidade morfogênica dos explantes nó cotiledonar, hipocótilo e cotilédone foi avaliada em meio Murashige & Skoog suplementado com benzilaminopurina - BAP (0,00; 2,5; 5,0; 7,5; ou 10,0 µM) e ácido naftalenoacético - ANA (0,00 ou 2,5 μM), utilizando-se delineamento experimental inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3 x 5 x 2, sendo 30 tratamentos para cada variedade. Foram analisados o número de brotos por organogênese direta e indireta e a porcentagem de explantes com calo. A expressão morfogenética in vitro de P. ixocarpa é influenciada pelo tipo de explante e pelos reguladores vegetais BAP e ANA. O explante nó cotiledonar é eficiente para a produção de brotos via organogênese direta nas duas variedades estudadas.

ABSTRACT Physalis ixocarpa Brot. ex Horm. is considered the most economically important species of the genus. Tissue culture is pointed out as a strategy for its propagation, but researches indicate that in vitro responses are genotype-dependent. This study aimed to evaluate the in vitro morphogenesis of the P. ixocarpa green and purple varieties, in view of the massive propagation of the species. The morphogenic capacity of the explants cotyledonary node, hypocotyl and cotyledon was evaluated in Murashige & Skoog medium supplemented with benzylaminopurine - BAP (0.00, 2.5, 5.0, 7.5 or 10.0 μM) and naphthaleneacetic acid - NAA (0.00 or 2.5 μM), using a completely randomized experimental design, in a 3 x 5 x 2 factorial scheme, with 30 treatments for each variety. The number of shoots per direct and indirect organogenesis and the percentage of explants with callus were analyzed. The in vitro morphogenetic expression of P. ixocarpa is influenced by the type of explant and by the plant regulators BAP and NAA. The cotyledonary node explant is efficient for the production of shoots via direct organogenesis in the two varieties studied.

RESUMO: A cultura de tecidos, através do crescimento mínimo, possibilita a conservação in vitro dos recursos genéticos vegetais, tornando-se uma técnica complementar aos métodos convencionais de conservação. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do meio de cultura suplementado com sacarose, manitol e agentes osmóticos sorbitol na indução de crescimento mínimo in vitro de A. cearensis, buscando estabelecer técnicas alternativas para conservação ex situ da espécie. Plantas com 10 dias foram inoculadas em meio de cultura WPM suplementado com diferentes concentrações de sacarose (87,64; 131,46; 175,28 e 262,92 mM) combinado com manitol ou sorbitol nas concentrações (0,0; 43,8; 65,73; 87,64 e 131,46 mM), solidificados com 0,7% de ágar. Foram avaliados a porcentagem de sobrevivência, número de folhas senescentes, comprimento da parte aérea, comprimento da raiz, massa seca da parte aérea, massa seca da raiz e número de brotos. A conservação de A. cearensis mostrou-se viável até 300 dias, em meio de cultura WPM suplementado com 262,92 mM de sacarose ou na combinação de 87.64 mM de sacarose com 43.80 mM de manitol. Assim sendo, além de apresentarem porcentagem de sobrevivência acima de 55.0%, as plantas conservadas nesses meios apresentaram um desenvolvimento normal e com melhores aparências com predomínio de folhas verdes uniformes ao longo do processo de armazenamento.

ABSTRACT: Slow-growth tissue culture allows in vitro conservation of plant genetic resources and is a complementary technique to conventional preservation methods. The objective of this study was to evaluate the effect of the culture medium supplemented with sucrose, mannitol and sorbitol osmotic agents on the induction of in vitro slow growth of A. cearensis, seeking to establish alternative techniques for ex situ conservation of the species. Plants with age of 10 days were inoculated in woody plant medium (WPM) supplemented with different concentrations of sucrose (87.64, 131.46, 175.28 or 262.92 mM) combined with mannitol or sorbitol at varying concentrations (0.0, 43.8, 65.73, 87.64 or 131.46 mM), solidified with 0.7% agar. The following parameters were evaluated: survival percentage, number of senescent leaves, aerial part length, root length, aerial part dry mass, root dry mass; and number of shoots. The conservation of A. cearensis was viable for up to 300 days in WPM supplemented with 262.92 mM of sucrose or the combination of 87.64 mM of sucrose with 43.80 mM of mannitol, because besides achieving a survival percentage greater than 55.0%, the plants conserved in these media presented normal development and the best appearances, with predominance of uniform green leaves during the storage process.

Umburana-de-cheiro é uma espécie nativa da Caatinga, amplamente utilizada pela população local, devido o valor madeireiro, ornamental, forrageiro e, principalmente medicinal. Considerando o significativo risco de extinção e a inexistência de estudos relacionados ao cultivo e propagação, objetivou-se com este trabalho estabelecer um protocolo para micropropagação de Amburana cearensis. Para isso, avaliou-se a influência do regulador vegetal 6-benzilaminopurina (BAP) em cinco concentrações (0,0; 2,22; 4,44; 8,88 e 17,76µM) sobre a multiplicação in vitro de diferentes explantes (segmento nodal, ápice caulinar e segmento cotiledonar) e na etapa de enraizamento testou-se diferentes concentrações de ácido indol butírico (AIB) (0,0; 2,5; 5,0 e 10,0µM) na presença e ausência de 1,0g L-1 de carvão ativado. Maior número de brotos (2,36) foi obtido na presença de 4,44µM de BAP, a partir do segmento cotiledonar e maior porcentagem de enraizamento (92,0%) ocorreu na presença de 10,0µM de AIB na ausência de carvão ativado. Não existiram dificuldades para o estabelecimento do protocolo de micropropagação de A. cearensis.

Umburana de cheiro is a species native to the Caatinga, widely used by local people, because the value of timber, ornamental, forage and especially medicinal. Considering the significant risk of extinction and the ausence of studies related to the cultive and propagation, the aim of this work was to establish a protocol for micropropagation Amburana cearensis. For this, we evaluated the influence of plant growth regulator BAP at five different concentrations (0.0, 2.22, 4.44, 8.88 and 17.76mM) on the in vitro multiplication of different explants (nodal segments, apex cotyledon and stem segment) and the rooting stage we tested different concentrations of IBA (0.0, 2.5, 5.0 and 10.0mM) in the presence and absence of 1.0g L-1 of activated charcoal. Highest number of shoots (2.36) was obtained in 4.44mM of BAP from cotyledonary segment and higher rooting percentage (92.0%) ocurred in 10.0mM of IBA in the absence of activated charcoal. There were no difficulties to the establishment of micropropagation protocol A. cearensis.

Orthophytum mucugense é uma bromélia ornamental endêmica do município de Mucugê-BA que está passível de extinção. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo de regeneração via organogênese direta para a espécie. Os explantes raiz, caule e folha, oriundos de plantas com diferentes idades, foram inoculados em meio de cultura MS½ suplementado com BAP e ANA. Os brotos foram inoculados em meio contendo AIB e carvão ativo. As plantas foram transferidas para substrato composto de vermiculita e terra. A maior taxa de brotação foi obtida com o explante caule com 20 e 40 dias de idade em meio com 0,65mM de ANA. Na fase de enraizamento, a presença de carvão ativo interferiu positivamente no comprimento da parte aérea e do sistema radicular das plantas. As plantas foram aclimatizadas com 100% de sobrevivência.

Orthophytum mucugense is an ornamental bromeliad endemic to the municipality of Mucugê-BA which is vulnerable to extinction. The aim of this study was to establish a regeneration protocol via direct organogenesis for the species. The explants root, stem and leaf from plants of different ages were inoculated in the MS½ culture medium supplemented with BAP and NAA. The shoots were inoculated on medium supplemented with IBA and activated charcoal. The plants were transferred to a substrate composed of vermiculite and soil. The highest rate of sprouting was obtained with stem explants of 20 and 40 days old in medium supplemented with 0.65mM of NAA. For rooting the presence of activated charcoal had a positive influence on the length of shoot and root plants system. The plants were acclimatized with 100% survival.

A conservação in vitro é uma estratégia de conservação ex situ que garante a manutenção da integridade genética e biológica das espécies. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de agentes osmóticos e temperatura na conservação in vitro de Syngonanthus mucugensis Giul. subsp. mucugensis. Os brotos foram inoculados em meio de cultura MS ½ contendo 7g L-1 de ágar e suplementado com 60g L-1 de sacarose, e com as concentrações de sacarose 15, 30 e 45g L-1 combinados com 0 e 15g L-1 de sorbitol ou manitol. As culturas foram mantidas em duas temperaturas (18 e 25°C). A porcentagem de sobrevivência das plantas foi avaliada mensalmente e ao final de 180 dias foram analisados o comprimento da parte aérea e da raiz, a porcentagem de folhas verdes, a porcentagem de explantes com brotos, o número de brotos por explante e o comprimento dos brotos. Os agentes osmóticos promoveram um decréscimo no crescimento das plantas, no entanto reduziram a sua viabilidade. Os resultados observados nos experimentos mantidos a 18°C foram significativamente superiores aos encontrados a 25°, para todas as variáveis analisadas. A conservação de S. mucugensis subsp. mucugensis pode ser feita à 18°C em meio de cultura MS ½ contendo 15g L-1 de sacarose, por até 180 dias, sem subcultivo.

The in vitro conservation is an ex situ conservation strategy that ensures the maintenance of genetic and biological integrity of species. The present study evaluated the effects of, osmotic agents and different temperature regimes on the in vitro conservation of Syngonanthus mucugensis Giul. subsp. mucugensis. The shoots were inoculated into half salt strength Murashige and Skoog culture medium (MS ½) containing 7g L-1 of agar. The culture medium was supplemented with 60gL-1 sucrose and with the sucrose concentrations 15, 30 and 45g L-1 combined with 0 and 15g L-1 of sorbytol or mannitol. Two different temperatures were used in these experiments (18 and 25°C). The percentage of plant survival was evaluated monthly and at 180 days were analyzed length of shoot and root, the percentage of green leaves, the percentage of explants with shoots and number of shoots per explants and shoot length. The addition of osmotic agents resulted in decreased growth of the plants and therefore reduced their viability. The averages observed in the experiments undertaken at 18°C were significantly superior to those observed at 25°C for all of the variables analyzed. S. mucugensis subsp. mucugensis can be cultured at 18°C in MS½ culture medium containing 15g L-1 of sucrose, for up to 180 days, without subculturing.

Syngonanthus mucugensis Giul. subsp. mucugensis é uma herbácea com grande potencial de utilização no comércio de flores secas ornamentais. A ocorrência restrita ao município de Mucugê-BA, Brasil, associado à exploração extrativista tem levado essa espécie ao risco de extinção. Neste estudo, objetivou-se avaliar o potencial organogênico de três diferentes tipos de explantes de S. mucugensis subsp. mucugensis visando ao desenvolvimento de um método alternativo para a sua propagação. A capacidade morfogênica de caule, folha e raiz foi testada utilizando o meio de cultura Murashige e Skoog com metade da concentração salina e diferentes concentrações dos reguladores de crescimento benzilaminopurina - BAP (0,00; 2,22 e 4,44 µM) e ácido naftaleno acético - ANA (0,00; 1,34 e 2,68 µM). Os eventos morfoanatômicos que levaram a formação dos brotos foram descritos. O caule demonstrou ser a melhor fonte de explante, apresentando 58,75% de regeneração de brotos via organogênese direta, em meio livre de regulador de crescimento; e 32,18 e 47,55% de regeneração de brotos por organogênese indireta na presença de 2,22 e 4,44 µM de BAP, respectivamente. Para folha, foi obtida a formação de calos sem regeneração de brotos, não sendo observada morfogênese, quando se utilizou raiz como explante. As análises histológicas mostraram que a regeneração de brotos em S. mucugensis subsp. mucugensis ocorreu tanto por via indireta, pela diferenciação do tecido calogênico desorganizado, quanto por via direta pela retomada da atividade meristemática em células maduras diferenciadas e proliferação de gemas pré existentes.

Syngonanthus mucugensis Giul. subsp. mucugensis is an herbaceous plant with significant economic value in the ornamental dry flower business. The restricted occurrence of the municipality Mucugê-BA, Brazil, exclusively associated with extractive exploitation, has considered this species as endangered. The objective of this work was to evaluate the organogenic potential of three different types of S. mucugensis subsp. mucugensis explants to promote the development of an alternative method to the propagation of the genetic resources of this important plant. The morphogenetic capacities of the leaf, stem and root this species was tested using Murashige and Skoog culture medium at half salt concentration and different concentrations of growth of regulators benzylaminopurine - BAP (0.00; 2.22 and 4.44 µM), and naphthalene acetic acid - NAA (0.00; 1.34 and 2.68 µM). The morphoanatomic events that lead to formation of shoots were described. Stems proved to be the best source of explants, showing 58.75% regeneration of shoot by direct organogenesis in the absence of growth regulators, and 32.18 and 47.55% of shoot regeneration by indirect organogenesis in the presence of 2.22 and 4.44 µM BAP, respectively. As for leaves, there was callus formation, but without regenerating shoots. Morphogenesis was not observed when roots were used as explants. The histological analyses showed that shoot regeneration in S. mucugensis subsp. mucugensis occurred both indirectly, by unorganized tissue differentiation, and directly through returning to merismatic activity in differentiated mature cells and preexisting bud proliferation.

Melocactus glaucescens (Cactaceae) é espécie endêmica da Bahia e está incluída na lista da IUCN e MMA como ameaçada de extinção. A transferência da condição in vitro para o ambiente ex vitro é uma etapa crítica, podendo ser um fator limitante para a produção das mudas micropropagadas. O objetivo deste trabalho foi analisar o efeito de diferentes substratos e do enraizamento na aclimatização de Melocactus glaucescens. As plantas propagadas in vitro foram mantidas sob 100% de luminosidade, com regas diárias por 75 dias. Os resultados demonstraram que o substrato adequado para a aclimatização deve conter 50% de terra vegetal e 50% de areia lavada; o tamanho mínimo do diâmetro e do comprimento da parte aérea para transferência para as condições ex vitro é de 5 mm e que as etapas de enraizamento in vitro e rustificação podem ser eliminadas da micropropagação de M. glaucescens. Estudos para demonstrar tempos de dessecação dos brotos acima de 5 mm são necessários, para se eliminar completamente a etapa do enraizamento in vitro para esta espécie.

Melocactus glaucescens (Cactaceae) is endemic to Bahia and is included in the IUCN and MMA lists as endangered species. Transference of in vitro cultures to ex vitro environment is critical and can become limiting for the production of micropropagated scions. The main objective of this work was to examine the effect of different substrates and rooting during acclimatization of Melocactus glaucescens. The plants were in vitro propagated and kept in 100 % light, on daily cycles for 75 days. The results suggested that the best substrate should consist of 50 % soil and 50 % sand; plantlets should be at least 5mm in diameter and height before being transferred; and that both steps in vitro rooting and harding could be eliminated from micropropagation of M. glaucescens. Further studies are still needed on desiccation time of shoots above 5 mm so that the step of in vitro rooting can be completely eliminated.